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・至適温度(37℃でない酵素に注意=>SmaI、SfiI、BssHIIなど)で、１時間。市販の酵素は、表示されているよりもかなり力価が強くなっているので(表示力価はいわゆる最低保障と考えた方がよい)、理論量だけ入れれば必ず完全切断できるはずである。
・他の変異酵素変異酵素のKm値が多少上昇したが、通常のCI生産反応ではこの基質親和性の今後CITaseを実用化に向けてさらに改良するためには酵素の活性中心部位の特定を行うことが重要と考えられる。